小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
1226 人阅读发布时间:2019-12-19 16:51
小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
品牌:Solarbio | 货号:P8620
| 有效期 |
2年 |
| 储存条件 |
RT,避光,有效期2年 |
| 外观(性状) |
液体 |
| 单位 |
盒 |
产品组成:
| 名称 |
货号 |
规格 |
| 各种动物外周血淋巴细胞分离液 |
|
200ml |
| 全血及组织稀释液 |
R1017 |
200ml |
| 细胞洗涤液 |
R1018 |
200ml |
产品简介:
本产品是一种用于分离动物外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血 细胞的密度差异,通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将淋巴细胞从外周血中分离出来。适用 于从动物抗凝血液中分离淋巴细胞,无菌条件下分离的淋巴细胞可用于培养。 本品仅供科研使用。
操作步骤:
1. 取新鲜抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可)或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液 或者PBS稀释全血。
2. 在离心管中加入适量分离液(当稀释后血液体积小于3mL时,加入3mL分离液;大于等于3mL,加入等体积 分离液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果),将稀释后的血液平铺到分离 液液面上方,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后将血液小心的平铺于分离液 上,因为两者的密度差异,将形成明显的分 层界面。如果样品较多加样时间较长,在离 心之前出现红细胞成团下沉属正常现象。)
3. 室温,水平转子500~1000g,离心20~30min (血液的体积越大所需的离心力越大,离心 时间越长,最佳的分离条件需摸索,离心转 速最大不超过1200g)。
4. 离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的 血浆层,中间是透明的分离液层,血浆与分 离液之间的白膜层即为淋巴细胞层,离心管 底部是红细胞与粒细胞。 5. 小心的吸取白膜层细胞到15mL洁净的离心 管中, 10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层 细胞。250g,离心10min。
6. 弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。
7. 重复步骤6
8. 弃上清,细胞重悬备用
资料格式:
TIM截图20191219164442.png
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