Masson 三色染色试剂盒

Masson 三色染色试剂盒
     Masson 三色染色是结缔组织染色知更鸟最经典的一种方法，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量容易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构稀松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
     Masson试剂盒的特点：◆染色稳定；◆分化时间短，1-2分钟；◆色彩清楚鲜艳；◆使用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；◆所染切片保存时间长且不易褪色。
产品组成：
试剂（A-1）   苏木素染色液         25ml
试剂（A-2）   三氯化铁水溶液       25ml
试剂（B）    盐酸乙醇分化液        50ml
试剂（C）    氨水水溶液            50ml
试剂（D）    丽春红酸性品红染色液 50ml
试剂（E）    乙酸水溶液            50ml
试剂（F）    磷钼酸水溶液          50ml
试剂（G）   苯胺蓝染色液           50ml
注：临用时取A1、A2等量混合，成为试剂A，不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合。形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小时后失去人力。
主要成分：
试剂（A）:主要由苏木素和三氯化铁组成。
试剂（B）:主要由乙醇和盐酸水溶液组成。
试剂（C）:主要由稀氨水水溶液组成。
试剂（D）:主要由丽春红和酸性品红组成。
试剂（E）:主要由乙酸水溶液组成。
试剂（F）:主要由磷钼酸水溶液组成。
试剂（G）:主要由苯胺蓝和弱酸组成。
操作步骤：
固定液应选用甲醛盐溶液、中性福尔马林试剂（10%，NBF）进行固定。
1、 切片脱蜡至水。
2、 试剂（A）染色5min-10min。
3、 试剂（B）分化、水洗。
4、 试剂（C）返蓝、水洗。
5、 蒸馏水或者去离子水洗1min。
6、 试剂（D）染色5-10min。
7、 试剂（E）洗1min。
8、 试剂（F）洗1-2min
9、 试剂（E）洗1min。
10、直接放入试剂（G）中染色1-2min。
11、试剂（E）洗1min。
12、95%乙醇快速脱水。
13、无水乙醇（1）5-10秒。
14、无水乙醇（2）5-10秒。
15、无水乙醇（3）5-10秒。
16、二甲苯（1）1-2分。
17、二甲苯（2）1-2分。
18、二甲苯（3）1-2分。
19、中性树胶封固。
染色结果：细胞核呈蓝色、胞浆、肌肉、红细胞呈红色，胶原纤维/蛋白呈蓝色。
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液或缩短染色时间
3、 经典masson三色染色中，常要求使用试剂A染核，也可用Harris 苏木精染核，但Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，因为色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。
4、 试剂B的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
5、 试剂E为0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鲜艳、如果使用量大可自行配制。
6、 用试剂F分化要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色。纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定。一般1-2min。
7、 返蓝液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot 促蓝液或0.1-1%碳酸锂水溶液。
8、 戴一次性手套操作。
9、 使用场所应通风，并远离火源。
储存条件：
   2-25℃ 避光  

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